Interazione piastrine-endotelio e sintesi di prostaciclina: ruolo di micro RNA

Starting date
December 1, 2010
Duration (months)
24
Departments
Medicine
Managers or local contacts
Minuz Pietro

Scopo del progetto è quello di valutare il ruolo delle piastrine nel modulazione postrascizionale della produzione di prostaciclina.



Saranno effettuati esperimenti ex vivo and in vitro:

1- Valutazione dell’attivazione piastrinica in vivo e produzione di prostaciclina in soggetti sani e pazienti con conclamato malattia cardiovascolare o a alto rischio per eventi cardiovascolari (pazienti diabetici) attraverso la misurazione della escrezione urinaria di 11-dehydro TXB2, CD40-ligand solubile , P-selectin e microparticelle piastriniche. La formazione di prostaciclina verrà messa in evidenza misurando 2,3-dinor-6keto-PGF1alpha. Le microparticelle di cellule endoteliali e leucociti verranno misurate insieme a ICAM-1 solubile.



2- Le microparticelle verrano isolate per testare in vitro i loro effetti sulle cellule endoteliali in coltura (HUVEC e cellule endoteliali progenitrici): espressione di COX-2, includendo il profilo di espressione del gene e la funzione celluare. I test saranno eseguiti in condizioni statiche e usando camere a flusso. Gli effetti dell’esposizione delle cellule endoteliali alle microparticelle piastriniche e ai fattori secreti dalle piastrine saranno studiati anche testando i loro effetti sulla migrazione e sull’angiogenesi (formazione in vitro di tubi capillari- saggio Matrigel).



3- Studio del pattern dei micro RNA pattern in cellule endoteliali in coltura dopo esposizione a piastrine, a particelle derivate da piastrine e a fattori secreti. Identificazione di micro RNA in microparticelle derivate da piastrine attivate.



4- Cellule progenitrici delle cellule endoteliali ottenute da soggetti sani e pazienti con rischio cardiovascolare o diabete saranno coltivate e testate per la presenza dei micro RNA, la loro caratterizzazione e per l’espressione della COX-2.



5- Valutazione del ruolo funzionale dei microRNA attraverso l’analisi in vitro degli effetti prodotti da micro RNA esogeni (silenziamento genico) in cellule endoteliali.

Sponsors:

MIUR - PRIN
Funds: assigned and managed by an external body

Project participants

Maurizio Degan
Alessandra Meneguzzi
Technical-administrative staff
Pietro Minuz
Full Professor
Barbara Molesini
Assistant Professor

Activities

Research facilities