Purificazione, cristallizzazione e studi di diffrazione di raggi X di una lectina con attività antitumorale da rizomi di Arundo donax: ADL (Arundo Donax Lectin)

Starting date
December 4, 2008
Duration (months)
24
Departments
Biotechnology
Managers or local contacts
Perduca Massimiliano

Il progetto è focalizzato sulla determinazione della struttura e delle proprietà biologiche di una lectina del rizoma di canna domestica (Arundo donax L.) avente
proprietà antiproliferative nei confronti di alcune linee cellulari tumorali. Le lectine sono proteine ubiquitarie che negli anni hanno sempre più attratto l'attenzione
dei ricercatori per la loro capacità di riconoscere e legare in modo specifico zuccheri liberi o presenti sulle membrane cellulari, diventando strumenti indispensabili
per la glicobiologia e la ricerca medica e farmaceutica. Il progetto prevede la determinazione della struttura primaria e delle eventuali modificazioni
post-traduzionali della lectina di Arundo donax con l'utilizzo sia delle tecniche convenzionali, che dell'analisi mediante spettrometria di massa. La componente
glicidica, se presente, sarà rimossa ed analizzata con combinazioni di digestioni con specifiche glicosidasi. La proteina, già disponibile nei nostri laboratori e
cristallizzata, sarà sottoposta all'analisi di diffrazione mediante raggi X per la determinazione della struttura tridimensionale. Si provvederà a valutare la specificità
e l'affinità del legame nei confronti di carboidrati con tecniche ELISA. Le proprietà antiproliferative saranno confermate su un ampio pannello di linee cellulari
tumorali e con tecniche di immunofluorescenza e western blotting si valuterà la capacità della lectina di legarsi selettivamente agli zuccheri presenti sulla superficie
cellulare di linee umane tumorali e non, prelievi bioptici e cellule batteriche.
Un altro scopo del progetto è di mettere a disposizione un potenziale nuovo reagente per la ricerca biomedica e clinica.

Sponsors:

Ministero dell'Istruzione dell'Università e della Ricerca
Funds: assigned and managed by an external body
Syllabus: FINANZMIUR - Finanziamento MIUR per la ricerca

Project participants

Massimiliano Perduca
Assistant Professor

Activities

Research facilities