Produzione e caratterizzazione di proteine ricombinanti - TEORIA (2009/2010)

Corso a esaurimento

Codice insegnamento
4S00203
Docente
Paola Dominici
crediti
2
Settore disciplinare
BIO/10 - BIOCHIMICA
Lingua di erogazione
Italiano
Periodo
I semestre dal 1-ott-2009 al 31-gen-2010.

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Orario lezioni

I semestre
Giorno Ora Tipo Luogo Note
martedì 11.30 - 13.30 lezione Aula L dal 10-nov-2009  al 31-gen-2010
giovedì 9.30 - 11.30 lezione Aula L dal 10-nov-2009  al 31-gen-2010

Obiettivi formativi

Obiettivo del corso e' quello di fornire conoscenze teoriche e pratiche sulle principali tecniche utilizzate per l'amplificazione, la purificazione e caratterizzazione di proteine ricombinanti.

Programma

CLONAGGIO: Scelta della proteina. Scelta del sistema di espressione. Scelta del vettore. Strategia di clonaggio.
ESPRESSIONE :
Espressione in E.coli : ottimizzazione dei livelli di espressione; miglioramento della solubilita’; miglioramento della stabilita’; diminuzione della tossicita’ . Co-espressione.
Proteine di fusione: GST, (His)6 : vantaggi e svantaggi
Espressione in cellule di insetto/ baculovirus.
Espressione in lievito
PURIFICAZIONE:
Estrazione e chiarificazione . Cromatografia. Conservazione della proteina purificata.
CARATTERIZZAZIONE:
Recenti sviluppi nello studio dell'interazione proteina-proteina

Modalità d'esame

Lo studente dovrà fare una relazione per ogni esercitazione di laboratorio, da presentare all’esame. L’esame sarà orale, e comprenderà, oltre alla trattazione di alcuni argomenti teorici, piu’domande sui laboratori.