Production and characterisation of recombinant proteins - Teoria (2005/2006)

Course partially running

Course code
4S00203
Name of lecturer
Paola Dominici
Number of ECTS credits allocated
2
Academic sector
BIO/10 - BIOCHEMISTRY
Language of instruction
Italian
Period
Second semester dal Mar 1, 2006 al Jun 9, 2006.

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Lesson timetable

Second semester
Day Time Type Place Note
Wednesday 10:30 AM - 12:30 PM lesson Lecture Hall M from Apr 5, 2006  to Jun 9, 2006
Thursday 10:30 AM - 12:30 PM lesson Lecture Hall M from Apr 5, 2006  to Jun 9, 2006
Friday 10:30 AM - 12:30 PM lesson Lecture Hall M from Apr 5, 2006  to Apr 12, 2006

Learning outcomes

Obiettivo del corso e' quello di fornire conoscenze teoriche e pratiche sulle principali tecniche utilizzate per l'amplificazione, la purificazione e caratterizzazione di proteine ricombinanti.

Syllabus

CLONAGGIO: Scelta della proteina. Scelta del sistema di espressione. Scelta del vettore. Strategia di clonaggio.
ESPRESSIONE :
Espressione in E.coli : ottimizzazione dei livelli di espressione; miglioramento della solubilita’; miglioramento della stabilita’; diminuzione della tossicita’ . Co-espressione.
Proteine di fusione: GST, (His)6 : vantaggi e svantaggi
Espressione in cellule di insetto/ baculovirus.
Espressione in lievito
PURIFICAZIONE:
Estrazione e chiarificazione . Cromatografia. Conservazione della proteina purificata.
CARATTERIZZAZIONE:
Determinazione quantita’ e concentrazione della proteina. Spettroscopia nella caratterizzazione di proteine. Caratterizzazione di proteine enzimatiche.

Assessment methods and criteria

Lo studente dovrà fare una relazione per ogni esercitazione di laboratorio, da presentare all’esame. L’esame sarà orale, e comprenderà, oltre alla trattazione di alcuni argomenti teorici, piu’domande sui laboratori.

Studying