Tecniche di colture cellulari - Cellule animali (2006/2007)

Corso disattivato non visibile

Codice insegnamento
4S00096
Docente
Chiara Dalla Pellegrina
crediti
2
Settore disciplinare
BIO/13 - BIOLOGIA APPLICATA
Lingua di erogazione
Italiano
Sede
VERONA
Periodo
2° Sem dal 1-mar-2007 al 8-giu-2007.

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Orario lezioni

Obiettivi formativi

Scopo del corso e’ fornire allo studente una panoramica delle moderne
tecniche di coltura delle cellule animali e dell’utilizzo delle colture
per la produzione e per la valutazione dell’attivita’ biologica di
molecole di interesse biotecnologico. Il corso intende inoltre fornire
allo studente alcuni cenni sull’uso delle colture cellulari in biomedicina
con particolare riferimento alle colture delle cellule staminali.

Programma

Modulo: Cellule animali
La cellula animale
• Vantaggi e svantaggi delle colture di cellule animali rispetto alla
sperimentazione con animali
• Colture primarie e il limite di Hayflick
• Trasformazione cellulare per l’ottenimento di linee stabilizzate
• Strumentazione e reagenti per le colture di cellule animali.
Composizione dei principali terreni. Sieri animali e terreni sintetici.
• La contaminazione delle colture. Il rischio biologico associato alla
manipolazione di cellule umane e le fondamentali procedure biohazard da
utilizzare nel laboratorio
• Modelli qualitativi e quantitativi per la sperimentazione. Cenni sulla
teoria statistica di Poisson. Applicazioni della teoria di Poisson negli
esperimenti di diluizione limite
• Clonaggio di cellule per la produzione di anticorpi monoclonali.
Quantificazione delle plasmacellule in vivo. Quantificazione del
potenziale clonogenico di una popolazione di cellule tumorali
• Coltura di cellule su feeder layer. Colture massive in mini-bioreattori
per la produzione di anticorpi monoclonali e di proteine in genere.
• Tecniche di immunofenotipizzazione.
• Tecniche fluorimetriche e strumentazione per l’analisi della
fluorescenza: il citofluorimetro, la microscopia confocale e la
fluorimetria per micropiastre
• Preparazione ed esecuzione di un esperimento con cellule animali: conta
cellulare e stima della vitalita’ del campione, saggi di citotossicita’,
misure della morte cellulare programmata e della necrosi
• Uso di cellule umane differenziate o differenziabili in vitro. Misure
elettriche e di permeabilita’
• Coltura di cellule tumorali in 3 dimensioni: morfologia e proprieta’,
saggi di citotossicita’
• Cellule staminali embrionali ed adulte. Tecniche di isolamento e
purificazione e loro possibili applicazioni

Modalità d'esame

Alla fine del corso lo studente dovra’ sostenere un esame scritto

Offerta formativa